細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)好壞的重要決定因素。近二十年來,無血清培養(yǎng)基越來越受到重視。它不含動(dòng)物血清或其他生物提取液,仍可使細(xì)胞在體外較長時(shí)間生長、增殖或維持。它繼天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基之后發(fā)展而來,尤其應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模工業(yè)培養(yǎng)。同時(shí),它也是研究細(xì)胞生長、增殖、分化及基因表達(dá)調(diào)控的有力工具。
無血清培養(yǎng)基是繼天然培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基之后的第三類培養(yǎng)基。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比較,無血清培養(yǎng)基是不含動(dòng)物血清或其他生物提取液,但仍可以維持細(xì)胞在體外較長時(shí)間生長、繁殖的一種培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基由于其組成成分相對清楚,制備過程簡單,在現(xiàn)代生物技術(shù)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。無血清培養(yǎng)技術(shù)也是闡明細(xì)胞生長,增值,分化及基因表達(dá)調(diào)控的基礎(chǔ)研究問題的有力工具。
目前,無血清培養(yǎng)基的研究有兩個(gè)方向:一是培養(yǎng)基中不含有任何動(dòng)物來源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當(dāng)前應(yīng)用較多的無血清培養(yǎng)基歸納為以下四種:
1.一般意義上的無血清培養(yǎng)基,用各類可代替血清功能的生物材料配制細(xì)胞培養(yǎng)基,如牛血清白蛋白(BSA),轉(zhuǎn)鐵蛋白,胰島素等生物大分子物質(zhì),以及從血清中提取的去除蛋白質(zhì)的混合脂類以及水解蛋白等。其特點(diǎn)是培養(yǎng)基中的蛋白含量較高,添加物質(zhì)的化學(xué)成分不明確,其中含有大量的動(dòng)物來源蛋白。
2.無動(dòng)物來源培養(yǎng)基:許多商業(yè)公司開發(fā)的無動(dòng)物來源培養(yǎng)基是基于生產(chǎn)重組藥物的安全考慮,培養(yǎng)基中的添加組分無動(dòng)物來源,需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細(xì)胞生長及增殖的需要。
3.無動(dòng)物蛋白培養(yǎng)基:培養(yǎng)基不用動(dòng)物來源的蛋白,但仍有部分添加物是來源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類培養(yǎng)基組分相對穩(wěn)定,但必須添加類固醇激素和脂類前體,并且對培養(yǎng)的細(xì)胞是高度特異性的。
4.化學(xué)組分限定培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基是目前安全的,最為理想的培養(yǎng)基,首先可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性,其中所添加的少量動(dòng)物來源的蛋白水解物、蛋白都是成分明確的組分。其特點(diǎn)是培養(yǎng)基的性質(zhì)確定,配起培養(yǎng)基來也比較方便。