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人胚腎細(xì)胞293T的處理要注意以下幾點(diǎn)

人胚腎細(xì)胞；293，上皮狀，早期報(bào)道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類(lèi)腺病毒載體擴(kuò)增的宿主。可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級(jí)別為2級(jí)。人胚腎細(xì)胞293T的處理要注意以下幾點(diǎn)：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃...

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小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1的儲(chǔ)存要注意的事項(xiàng)

從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長(zhǎng)的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3亞克隆4（ATCCCRL-2593）和MC3T3亞克隆14（ATCCCRL-2594）在抗壞血酸和3到4mM無(wú)機(jī)磷酸鹽中生長(zhǎng)表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。它們10天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。MC3T3亞克隆24（ATCCCRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCCCRL-2596)在抗壞血酸中生長(zhǎng)表現(xiàn)出很差的成...

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小鼠成纖維細(xì)胞L929傳代流程的注意事項(xiàng)

小鼠成纖維細(xì)胞L929分離自小鼠皮膚組織的貼壁細(xì)胞，成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞(mesenchymalcell)分化而來(lái)。功能活躍的細(xì)胞稱(chēng)為成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。纖維細(xì)胞（fibrocyte），結(jié)締組織中數(shù)目最多的細(xì)胞，相對(duì)靜止的細(xì)胞稱(chēng)纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞數(shù)目最多，胞體大，為多突的紡錘形或星形的扁平細(xì)胞，細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，細(xì)胞輪廓不清，具有突起。其...

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介紹DC細(xì)胞的兩種來(lái)源途徑

樹(shù)突狀細(xì)胞（Dendriticcells,DC）是機(jī)體功能較強(qiáng)的專(zhuān)職抗原遞呈細(xì)胞，它能高效地?cái)z取、加工處理和遞呈抗原，未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。DC的來(lái)源有兩條途徑：①髓樣干細(xì)胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱(chēng)為髓樣DC，也稱(chēng)DCl，與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞；包括朗格漢斯細(xì)胞，間皮（或真皮）DCs以及單核細(xì)胞衍生的DCs等，②來(lái)源于淋巴樣干細(xì)胞，稱(chēng)為淋巴樣DC或漿細(xì)胞樣DC，即DC2，...

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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞常用的分離方法有哪些

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，是人們?cè)诓溉閯?dòng)物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細(xì)胞的多種分化潛能的細(xì)胞亞群。它們對(duì)骨髓中的造血干細(xì)胞（HSC）不僅有機(jī)械支持作用，還能分泌多種生長(zhǎng)因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）來(lái)支持造血。目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢(shì)特性，定期換液除去不貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化及擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細(xì)胞...

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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC的使用注意事項(xiàng)

血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)維持血管動(dòng)態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子。內(nèi)皮細(xì)胞還釋放控制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。這些過(guò)程都可以用培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行體外研究，人臍靜脈和動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是這類(lèi)研究中常用的細(xì)胞類(lèi)型。除了普通的內(nèi)皮細(xì)胞特征例如“鵝卵石狀”，VIII因子陽(yáng)性著色，能攝取乙酰基化低密度脂蛋白，人臍血管內(nèi)皮細(xì)CD31染色陽(yáng)性。用IL-1或TNF-α預(yù)先處理過(guò)的細(xì)胞也能選擇性地表達(dá)E-selectin和VCAM。人臍...

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大鼠心肌細(xì)胞的特點(diǎn)及運(yùn)輸保存

心肌的工作細(xì)胞包括心房肌和心室肌。心肌細(xì)胞為短柱狀，一般只有一個(gè)細(xì)胞核，心肌細(xì)胞之間有閏盤(pán)結(jié)構(gòu)。該處細(xì)胞膜凹凸相嵌，并特殊分化形成橋粒，彼此緊密連接，但心肌細(xì)胞之間并無(wú)原生質(zhì)的連續(xù)。心肌細(xì)胞的細(xì)胞核多位于細(xì)胞中部，形狀似橢圓或似長(zhǎng)方形，其長(zhǎng)軸與肌原纖維的方向一致。肌原纖維繞核而行，核的兩端富有肌漿，其中含有豐富的糖原顆粒和線粒體，以適應(yīng)心肌持續(xù)性節(jié)律收縮活動(dòng)的需要。大鼠心肌細(xì)胞的細(xì)胞特性：1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常心臟組織。2)細(xì)胞鑒定：肌球蛋白重鏈(MHC)免疫熒光染色為...

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Ⅱ型肺泡細(xì)胞在調(diào)節(jié)肺免疫防御中起重要作用

Ⅱ型肺泡細(xì)胞指的是大肺泡細(xì)胞，又稱(chēng)分泌細(xì)胞。分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰卵磷脂)，以降低肺泡表面張力。肺巨噬細(xì)胞，來(lái)自于血液?jiǎn)魏思?xì)胞。吞噬了較多塵粒的被稱(chēng)為塵細(xì)胞，而心衰細(xì)胞則是心力衰竭患者肺內(nèi)出現(xiàn)的吞噬了血紅蛋白分解的含鐵血黃素的巨噬細(xì)胞。肺泡與肺部毛細(xì)血管緊密相連。兩者的膜大部分融合，有助于氣體的快速擴(kuò)散。而肺泡表面液體層，Ⅰ型肺泡細(xì)胞與基膜，薄層結(jié)締組織，毛細(xì)血管基膜與內(nèi)皮組成了所謂的氣一血屏障。細(xì)胞較小，成立方形或圓形，散落在I型肺泡細(xì)胞之間。核圓形，胞質(zhì)著色淺，呈泡沫...

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